抗体筛选服务
金唯智可以提供基于高通量测序的抗体筛选服务,通过杂交瘤测序、免疫组库测序、单B 细胞测序或抗体文库测序测定抗体全长序列或者可变区序列,可以快速、准确地筛选出具有特定功能的抗体序列,并对其进行深入分析。这些技术广泛应用于抗体药物开发、免疫学研究以及疾病诊断等领域。

服务内容
杂交瘤测序
金唯智提供基于不同测序平台的杂交瘤测序技术方案:
基于高通量测序平台的杂交瘤抗体基因谱测序(HybSeq-HTTM),可对多个样本进行批量的扩增可变区、测序以及下游分析,大大提高了抗体测序通量和准确性,降低成本。
基于传统的Sanger平台的杂交瘤细胞抗体基因测序(HybSeqTM),可快速检测抗体基因全长序列。
HybSeq HT™杂交瘤抗体基因谱测序
1.低偏好,低背景
使用5’RACE技术,避免偏好性;减少了扩增体系中的引物数据,避免干扰
2.高覆盖度
基于恒定区设计,有完整的引物体系,可最大程度覆盖抗体基因
3.高保真,高重现性
采用PE300全长测序,不做打断,保留低拷贝转录本,可获取VDJ全长序列析报告
HybSeq™杂交瘤抗体基因测序
1.检测抗体基因全长序列
基于Sanger测序,可扩增出抗体基因的全长序列,准确度高
2.低扩增偏好
RACE扩增,具有统一5’接头,极大减少扩增偏好性
3.低扩增背景
相较于多重PCR,极大程度减少的扩增体系中的引物数量,避免彼此干扰
免疫组库测序
B细胞抗原受体(BCR)和T细胞抗原受体(TCR)通过V(D)J重组而产生的巨大多样性是适应性免疫系统的关键。金唯智利用5’RACE技术特异性扩增包含CDR的可变区序列,结合高通量测序及生物信息学分析可以全面评估免疫组库的多样性。
利用免疫组库测序可获取以下信息:
- 个体内抗体VDJ序列信息及对应丰度信息
- 可变区CDR1/CDR2/CDR3核酸及氨基酸信息
- 组成可变区的抗体VDJ基因信息不同时间维度下,抗体序列及丰度的变化
- 不同时间维度下,抗体序列及丰度的变化
单B细胞抗体基因测序
单B细胞抗体技术是一种先进的抗体制备方法,它利用单个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,从免疫动物组织或外周血中分离出特异性B细胞,并通过单细胞PCR技术扩增重链可变区和轻链可变区DNA序列,最终在哺乳动物细胞内表达获得具有生物活性的单克隆抗体。金唯智可以提供基于10x Genomics平台的高通量平台以及96孔的单B细胞测序,技术流程如下:

抗体文库多样性测序
采用高通量测序技术对抗体文库进行测序,可以全面揭示原始文库质量和淘选前后抗体文库基因组成的变化,获得准确的抗原特异性抗体序列。
基于待测Vector中不同长度的抗体序列,金唯智可以提供基于illumina和PacBio平台的抗体文库多样性测序服务:
- illumina PE300测序——分别扩增VH和VL序列,并进行单独测序获取各自的丰度信息
- PacBio测序——能够实现10Kb以上的长度长优势直接对扩增产物进行测序,HiFi reads质量可以实现99.9%准确度;同时扩增VH和VL,获得重链和轻链全长可变区序列及配对信息