FAQ
A:
主要为哺乳动物细胞系和大肠杆菌
A:
安升达可提供从sgRNA设计合成到稳定细胞株筛选的一站式服务(从头到尾都可以)
A:
(1)载体构建层面:2~3周
(2)ssDNA合成:4周
(3)基因敲除:8~10周
(4)基因敲入:16~20周
(5)定点编辑:16~20周
A:
如果是要求细胞传代后仍然保持稳定敲除,建议使用慢病毒感染的方法,这样敲除后的细胞是一直保持的稳定突变株。
A:
安升达保证最终提供的细胞系是纯合的移码突变形式。
A:
安升达现在常用的转染方式是 脂质体和慢病毒 两种形式,脂质体方式后期会存在转入质粒的丢失的可能性,慢病毒形式则可以使传代的细胞株仍能稳定表达
A:
安升达现阶段可提供从200nt至2000nt的ssDNA。
关于安升达基因KO/KI服务
安升达在全面的一二三代测序服务(读基因),和经验丰富的基因合成服务(写基因)基础上,隆重推出基因KO/KI服务:
1、 一站式—可提供从sgRNA设计到高深度全基因组测序脱靶分析的一站式基因编辑服务;
2、 精准可靠的合成—多年的基因合成服务经验保证高特异性sgRNA序列设计和合成精准可靠;
3、 可个性化定制—灵活的定制服务可以让用户针对特定实验目的,指定相应的启动子、密码子优化、抗性标记等,并可定制化克隆至客户提供的任何CRISPR载体;
4、 高通量细胞株筛选—安升达结合自身完善的一代、二代、三代测序平台,推出NGS-Genotyping服务,利用NGS测序技术及安升达独有的开发流程进行细胞株筛选,可同时检测几十到几百个克隆,并通过测序Reads定量检测克隆突变率以及突变的类型,可在短时间内筛选出基因突变阳性克隆;
5、 全基因组脱靶检测—针对客户担忧的脱靶效应,采用安升达自主研发的CRISPR-WGS高深度全基因组测序的方法,结合生物信息分析,可以更加全面准确的检测到因脱靶导致的未知的突变,使CRISPR的应用更加可靠。