引物纯化方式 选择指南

为了提高纯化效率,提高引物合成质量,金唯智提供多种引物纯化方式:DSL(脱盐)纯化、tPAGE纯化、hPAGE纯化、HPLC纯化、DHPLC纯化等。

引物纯化方式的适用范围及建议

纯化方式 引物长度 (nt) 应用 纯化方式介绍
5~10 11~40 41~60 61~90 91~130 131~200
DSL 适用 适用 适用 适用 不适用 不适用 常用于 PCR 扩增、全基因合成及 Sanger 测序等 脱盐,去除产品合成中的盐杂质
tPAGE 适用 推荐 推荐 不适用 不适用 不适用 针对 60 nt 以下的普通引物,推出的 PAGE 级别的纯化方式。满足大多数分子生物学实验需求,如 PCR 扩增、质粒 DNA 测序、全基因合成、定点突变、PCR 克隆、qPCR 扩增引物等 区别于脱盐的快速简易纯化,去除合成中的盐杂质及其他合成杂质
hPAGE 不适用 适用 适用 推荐 推荐 不适用 针对 60 nt 以上的普通引物的纯化特别有效,用于定点突变、克隆、凝胶迁移实验、RUO 级别分子诊断 使用 PAGE 胶进行纯化,去除产品合成中的非目标产物
HPLC 推荐 推荐 适用 适用 不适用 不适用 小于 40 nt 普通引物的纯化,用于定点突变、克隆、凝胶迁移实验、治疗用途等;NGS 测序建库引物、修饰或标记引物;商业化的诊断引物或探针等 使用液相色谱的方式进行纯化,去除合成中的非目标产物
DHPLC 不适用 适用 适用 适用 推荐 推荐 对纯度要求极高,hPAGE 及 HPLC 纯化无法满足需求的实验;长链及超长链引物等 特殊的制备工艺,合成方法缩合效率更高,纯化方法可以更精准地筛分、富集高纯度目标全长寡核苷酸组分