引物纯化方式 选择指南
为了提高纯化效率,提高引物合成质量,金唯智提供多种引物纯化方式:DSL(脱盐)纯化、tPAGE纯化、hPAGE纯化、HPLC纯化、DHPLC纯化等。
引物纯化方式的适用范围及建议
| 纯化方式 | 引物长度 (nt) | 应用 | 纯化方式介绍 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 5~10 | 11~40 | 41~60 | 61~90 | 91~130 | 131~200 | |||
| DSL | 适用 | 适用 | 适用 | 适用 | 不适用 | 不适用 | 常用于 PCR 扩增、全基因合成及 Sanger 测序等 | 脱盐,去除产品合成中的盐杂质 |
| tPAGE | 适用 | 推荐 | 推荐 | 不适用 | 不适用 | 不适用 | 针对 60 nt 以下的普通引物,推出的 PAGE 级别的纯化方式。满足大多数分子生物学实验需求,如 PCR 扩增、质粒 DNA 测序、全基因合成、定点突变、PCR 克隆、qPCR 扩增引物等 | 区别于脱盐的快速简易纯化,去除合成中的盐杂质及其他合成杂质 |
| hPAGE | 不适用 | 适用 | 适用 | 推荐 | 推荐 | 不适用 | 针对 60 nt 以上的普通引物的纯化特别有效,用于定点突变、克隆、凝胶迁移实验、RUO 级别分子诊断 | 使用 PAGE 胶进行纯化,去除产品合成中的非目标产物 |
| HPLC | 推荐 | 推荐 | 适用 | 适用 | 不适用 | 不适用 | 小于 40 nt 普通引物的纯化,用于定点突变、克隆、凝胶迁移实验、治疗用途等;NGS 测序建库引物、修饰或标记引物;商业化的诊断引物或探针等 | 使用液相色谱的方式进行纯化,去除合成中的非目标产物 |
| DHPLC | 不适用 | 适用 | 适用 | 适用 | 推荐 | 推荐 | 对纯度要求极高,hPAGE 及 HPLC 纯化无法满足需求的实验;长链及超长链引物等 | 特殊的制备工艺,合成方法缩合效率更高,纯化方法可以更精准地筛分、富集高纯度目标全长寡核苷酸组分 |