通过对16S/18S/ITS 等微生物物种特征序列的扩增及高通量测序，结合专业的生物信息分析，可以快速准确地鉴定样品中微生物( 细菌/ 真菌/古菌/藻类等 )的物种组成和多样性情况，并同时获得群落进化关系、物种结构、群落功能等多种生物信息，该方法广泛应用于微生物种群的多样性研究。

金唯智采用特有的MetaVX® 16S rDNA扩增系统，结合标准化的样品收集，核酸提取和生物分析流程，可以最大程度展现样品中微生物种群的多样性，是一种高效、准确、快捷的微生物分析解决方案。

关于样品提取

但是，无论是什么样的解决方案，都是建立在样品提取的基础上。如果样品提取不合格，那么再完美的解决方案也无法解决科研问题。因此，样本提取是关键中的关键。对于五大样品类型，该如何有效提取才能保证实验结果的准确性呢?

样品制备之粪便样品篇

收集样本：一般对于人的粪便，要求用无菌粪便收集器或其他灭菌器皿收集粪便样本，要注意即刻进行样本标记并低温保存;对于小鼠粪便，分别收取采样小鼠的粪便，立即进行收取，尽量不要暴露在空气中太长时间，避免污染和降解。

分装保存：由于有些样本取样不易，因此我们建议一次收集后分装保存，对于人的粪便，我们建议使用无菌牙签挑取内部样本，尽量排除空气污染及防止样本降解，使用灭菌离心管分别称取0.2 g左右的样本，每个样本分装10管左右备用，标记好后即刻放入-80℃保存。当然由于小鼠个体较小，可能粪便样本不足0.2 g时，我们可以适当将多个生物学重复样本进行混合，进行保存。

建议：使用GENEWIZ提供的粪便收集器;并且若遇上收集困难或者十分珍贵的样本，请老师注意备份，避免再次收集耗费更大的人力物力，并且无法保证实验条件完全一致，导致后续分析无法达到预期。

DNA提取：建议使用QIAGEN 或GENEWIZ粪便提取试剂盒。

注意事项：粪便样本提取时注意胆汁酸盐、复杂多糖等杂质的去除。

样品制备之土壤篇

样本收集：取样区域一般是根据实验设计进行选择，建议选取具有代表性的土壤;采样时使用的所有工具、采集袋或其他物品均要使用已灭菌的;若野外没有合适的条件进行灭菌处理，可以使用采集的土壤对取样工具进行擦拭，尽量去除干扰;采集时一般选取 5-10 cm处土壤，去除杂质，将一定量的土壤进行分装标记，每袋样品约5 g，密封后立即-20℃保存。

建议：土壤取样时时常会碰到杂质含量较高，取样时需要对杂质进行过滤，避免石块等杂质戳破采集袋等情况的发生，也会给后续提取造成干扰。

提取：建议使用QIAGEN 或GENEWIZ土壤试剂盒。

注意事项：土壤样本提取时含有大量的腐殖酸、重金属等杂质需处理。

样本制备之水体环境篇

样本收集：根据实验设计确定取样的深度和范围，由于水体样本的特殊性，取样体积需大于2 L，取样工具需灭菌处理，采样后进行滤膜过滤，选择合适孔径的滤膜。对于澄清水体或者略浑浊水体，选用0.22 μm或者0.45 μm的滤膜;对于浑浊水体，建议先用大孔径的滤膜过滤一遍，再用小孔径的滤膜过滤;水体泥样的采集提供大于2 g样本。

建议：由于水体样本的特殊性，样本直接保存困难，因此建议一次取样足够，一般提取一次需要1-2张滤膜，分装保存足够量的滤膜，便于后续实验的使用。

DNA提取：建议使用QIAGEN 或GENEWIZ土壤试剂盒。

注意事项：取样与提取时，注意样品的交叉污染。

样本制备之肠道内容物篇

样本收集：一般取样时实验对象已死亡(动物)，需要使用无菌的解剖刀，尽量在无菌状态下取出整个肠道，将实验所需的肠段的内容物切下，将内容物取出放置在无菌离心管中，建议分装保存，便于后续实验需求，低温保存运输;若是无法立即抽提，建议将样本先置于液氮中冷冻2-4小时以上，保证冷冻充分再转移到-80℃保存。

建议：由于肠道内容物来源不一，一般来说保存单个样本取样量如下：大型动物，如牛、羊500 mg-1000 mg/管;中型动物，如大鼠、家兔 200-1000 mg/管;小型动物，如小鼠 200-500 mg/管;对于肠道内容物较少动物，如鱼、 虾 ≥100 mg/管。为保证实验顺利进行，在采样允许的情况下，尽量多采集样品。

DNA提取：建议使用QIAGEN 或GENEWIZ粪便提取试剂盒。

注意事项：样本提取时注意胆汁酸盐、复杂多糖等杂质的去除及内容物的分离。

样本制备之发酵食品篇

样本收集：根据实验设计确定取样的样品，由于发酵食品的特殊性，取样体积需包装在无菌的密封容器内，取样工具需灭菌处理。酱油需大于100 mL。

建议：由于样本的特殊性，因此建议一次取样做好备份，一般提取一次需要100 mL左右，分装保存足够量，便于后续实验的使用。

DNA提取：建议使用QIAGEN 或GENEWIZ土壤试剂盒。

注意事项：酱油类发酵食品，需进行前处理，具体可咨询GENEWIZ实验室。

如果您还有其他疑问，可以发送邮件至NGS.Service@Azenta.com或拨打电话400-8100-669 选项3进行咨询。