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微生物基因敲入

金唯智提供从gRNA设计合成到基因敲入菌株筛选的一站式服务

1、宿主菌株鉴定和目的基因检测

2、gRNA的设计制备

3、gRNA载体构建(ssDNA的合成或Donor载体构建)和转化

4、基因敲入单克隆菌株筛选与鉴定

5、基因敲入单克隆菌株的质量检测和交付


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微生物基因编辑

服务标准:

微生物基因敲入

     服务流程:

微生物基因敲入

利用CRISPR-Cas9技术在大肠杆菌中定点敲入红色荧光蛋白基因实例

 

第一阶段:宿主菌株及目标基因验证

1、宿主菌株状态检测

2、目标基因检测

 

第二阶段:gRNA设计及基因编辑载体构建

1、sgRNA设计

2、基因编辑载体构建

 

第三阶段:基因编辑菌株的筛选

1、 基因编辑菌株筛选

基因编辑菌株筛选

第四阶段:基因编辑的宿主菌株质量检测与交付

1、PCR验证红色荧光蛋白基因成功敲入

PCR验证红色荧光蛋白基因成功敲入

2、测序验证红色荧光蛋白成功敲入

3、编辑菌株荧光表达验证:

肉眼观察图

在绿色激发光下菌落有红色荧光,表明红色荧光蛋白敲入成功且可以正常表达。

绿色激发光下菌落有红色荧光图

*您也可以下载基因敲入菌株构建参数表(注明:此表格仅针对E-mail订单使用)并按照要求填写发送邮件至EditGene@genewiz.com.cn