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基因编辑标准样品的使用说明

 

感谢您订购金唯智的基因编辑服务!以下为基因编辑产品的使用注意事项,请仔细阅读以下说明并按要求操作,希望对您的实验有所帮助。

【冻干质粒/ssDNA】

使用时,请将样品管于12000转/分钟离心1分钟,使DNA聚集到管底,小心开启管盖,以免引起粉末飞扬丢失。 再加入适量ddH2O或TE缓冲液,盖好管盖,涡旋震荡使其充分溶解。

【液态质粒】

使用时,请将样品管于12000转/分钟离心1分钟,使DNA聚集到管底,再开启使用。质粒的保存温度为-20°C,如果您不是一次性用完,可先分装成多管,分步取用,以免反复冻融对质粒质量产生影响。

【穿刺菌】

穿刺菌4°C可贮存1个月。扩大培养时,您可挑取部分穿刺菌接种到3~5mL的液体培养基中,37°C培养。如需长期使用,您可取部分活化后的菌液制备成甘油菌,-80°C保存。

【甘油菌】

甘油菌-80℃可长期保存。

扩大培养时您可以选择以下两种方法:

挑取甘油菌一环,接种在LB固体培养基上(活化菌种),37℃ 培养过夜(约16 小时);挑取一个菌落转接在LB液体培养基中,37℃ 振荡过夜(约12~16小时)。

直接吸取10~20 μL甘油菌,接种在LB液体培养基中, 37℃ 振荡过夜(约12~16 小时)。

【常温细胞】

收到T25培养瓶装的细胞后请尽快进行以下实验:

首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请及时与金唯智基因编辑部门联系;

用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2~4小时,以便稳定细胞状态;

静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态;

贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5mL左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松;

悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50mL无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5mL培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5mL;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。

 

如需长期使用,您可将传代了的细胞冻存在-80°C保存。