引物纯化方式选择指南

为了提高纯化效率,提高引物合成质量,金唯智提供多种引物纯化方式:DSL(脱盐)纯化,tPAGE纯化,hPAGE纯化,HPLC纯化。

 

tPAGE和hPAGE纯化

tPAGE纯化和hPAGE纯化是金唯智针对原PAGE纯化技术进行升级后推出的两种引物纯化方式,可以应用于不同长度类型的引物,纯化效果优于PAGE纯化级别,价格更优惠!

tPAGE: 适用于60 mer以下引物的纯化。为了保证更好的质量,纯化后的引物,均需通过质谱检测,保证了引物的高质量,高于PAGE级纯度。

hPAGE:对60 mer以上的普通引物的纯化特别有效。双重精制,既可以去除合成中的短链引物也可以去除合成中的盐分,引物的纯度可大于90%,保证引物的纯度。

 

其他引物纯化方式介绍

脱盐(DSL):又称为简易反相柱,氨盐可以被有机溶液洗脱,但不会被水洗脱,能有效的去除盐分,纯度可满足大多分子生物学实验需求。优点:速度快,价格优,通量大。缺点:该方法不能有效去除比目的片段略短的引物小片段。

高效液相(HPLC):采用高效液相色谱的原理,对引物DNA进行纯化是一种非常有效的纯化方式,能达到很高的纯度和灵敏度。纯化后,引物的纯度可大于90% 。特别适合用于短链(小于40 mer)引物和修饰引物的纯化。优点:对纯化短链引物(<40 mer)特别有效,缺点:成本高,批量生产效率不高。如实验对纯度要求非常高,建议选用HPLC与hPAGE双重精制。

 

引物纯化方式的适用范围及建议

纯化方式 引物要求 应用
5~10 mer 11~40 mer 41~60 mer 61~90 mer 91~150 mer
DSL纯化 适用 适用 适用 适用 不适用 常用于PCR扩增、亚克隆、点突变、全基因合成及Sanger测序等。
tPAGE纯化 适用 推荐 推荐 不适用 不适用 针对60 mer以下的普通引物,推出的PAGE级别的纯化方式。
hPAGE纯化 不适用 适用 适用 推荐 推荐 对60 mer以上的普通引物的纯化特别有效,用于定点突变、克隆、
蛋白结合凝胶迁移电泳分析、治疗与诊断。
HPLC纯化 推荐 推荐 适用 适用 不适用

小于40 mer的普通引物的纯化,用于定点突变、克隆、
蛋白结合凝胶迁移电泳分析、治疗用途;

修饰引物的纯化;

商业化的诊断引物或探针。