ssDNA合成

ssDNA常作为“Donor template”可实现定点修复和长片段的敲入，研究表明ssDNA作为同源臂具有更高的定点修复和大片段敲入的效率，更易筛选获得定点修复和大片段的敲入的突变体。

金唯智提供合成长度150-10000nt的ssDNA

单链DNA(ssDNA)的用途

单链构象多态性 (SSCP)技术
核酸酶S1定位
探针制备和标记
差减杂交
同源重组修复(HDR)的模板，据文献报道，ssDNA作为修复模板，效率比dsDNA高出9倍 (CRISPR/Cas9基因敲入)

产品优势

高保真——结合Sanger测序验证，确保序列准确可靠

无毒性——金唯智通过PCR方法获得的超长ssDNA无毒性，具有更高的同源修复和敲入效率

合成长度长——可按客户要求合成150~10000nt的ssDNA

服务流程

	不同规格发货周期/周
长度/nt	1ug	2ug	3ug	6ug	10ug	20ug	40ug
151-250	2-3	3-4		4-5
251-500		2-3	3-4	4-5
501-2,000			4-5	5-6
2,000-5,000			5-6	6-7
5,001-8,000			5-6	6-7
8,000-10,000	问询

注：以上服务周期和价格适用于标准序列，金唯智项目管理人员会对序列难易程度进行评估

常见问题与解答：

金唯智ssDNA合成长度是多少？

150 nt-10000 nt。

金唯智ssDNA合成对序列是否有要求？

150 nt-10000 nt。我们可以合成大部分序列，具体是否可以合成可以发送您的序列具体是否能合成可以发送您的序列到EditGene@Azenta.com，我们会对序列进行分析是否能够合成并进行回复。

金唯智ssDNA QC方法和放行标准。

QC方法为：使用核酸外切酶进行酶切验证，Sanger测序验证，nanodrop进行定量分析。放行标准：核酸外切酶完全消化发货样品，sanger测序验证无突变、缺失，nanodrop定量达到发货量。

金唯智ssDNA 发货前是否检测内毒素？

制备过程中无内毒素引入，发货前不进行内毒素检测。

金唯智ssDNA产品是RNase Free吗？

产品制备过程中的溶解剂为RNase Free Water，产品可与RNP复合物一起用于小鼠胚胎注射。

ssDNA产品制备过程中的溶解剂是什么？

RNase Free Water。

ssDNA是用什么方法构建的，PCR还是酶切？

生物学的方法构建。

ssDNA的纯度，纯化方式是HPLC还是Page？

采用生物学方法制备，不使用HPLC或者PAGE纯化。

全新升级|高保真Long ssDNA助力大片段基因敲入

基因组编辑技术CRISPR/Cas9自2013年被《科学》杂志列为年度十大科技进展之一以来，受到越来越多的科研工作者的高度重视，成为基因敲除和基因敲入的主要研究手段。

针对模式生物和细胞中进行基因序列替换、外显子突变位点修复和融合标签等大片段的敲入等方面，现在普遍面临着dsDNA片段的随机插入和片段敲入效率低等风险，难以在精准的基因编辑上被广泛应用。相比之下，Long ssDNA，因其片段敲入效率高、能有效避免dsDNA片段在基因组中随机插入的问题等优势脱颖而出。

*您也可以下载ssDNA制备服务参数表（注明：此表格仅针对E-mail订单使用）并按照要求填写发送邮件至EditGene@Azenta.com 。

金唯智提供的CRISPR/Cas9技术服务的授权来自Broad研究所。

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